如何接種瓊脂平板

什麼是瓊脂平板？

瓊脂平板是一種常見的實驗室工具，用於生長和維持細菌、真菌或病毒培養。瓊脂平板由一個無菌培養皿組成，裡面充滿了一種營養豐富的凝膠狀物質，稱為瓊脂，這種物質源自於藻類。瓊脂是微生物生長的理想培養基，因為它易於使用、熔點低且在室溫下凝固。

就蘑菇而言，它們並不以瓊脂本身為食，而是以瓊脂中添加的營養素和水分為食。添加到瓊脂中的特定營養素取決於所種植蘑菇的類型，但通常包括葡萄糖、麥芽萃取物和酵母萃取物。瓊脂平板為蘑菇生長和發育菌絲體提供無菌和受控的環境。

真菌學家經常使用瓊脂平板作為分離和選擇特定蘑菇菌株以進行進一步培養的手段。透過將孢子或組織樣本接種到瓊脂平板上，真菌學家可以觀察和監測單一菌落的生長，選擇最健康和最有活力的菌落，並將它們轉移到新的瓊脂平板或其他生長基質上。

所有從 Olympus Myco 購買的瓊脂平板均已在商用高壓鍋中滅菌，以有效消除瓊脂混合物中可能存在的任何潛在的活生物體或孢子。

接種瓊脂平板

使用開放式瓊脂板時，強烈建議使用流動罩或靜氣箱 (SAB)，以盡量減少空氣污染的風險。這些工具可以降低空氣中的顆粒和微生物幹擾培養物生長的可能性，有助於提高實驗的成功率。

  1. 用酒精或消毒液擦拭乾淨的工作表面。
  2. 將瓊脂板從流動罩或 SAB 內的密封袋中取出。確保在流動罩或 SAB 內執行所有程序。
  3. 將板整齊地堆放，一次僅使用一個開放的板，以最大程度地減少污染風險。
  4. 打開板，然後添加孢子。
    • 液體培養注射器：在將培養物添加到板中之前，請確保對針頭進行消毒。將少量液體培養物（<1cc）加入瓊脂板的中心。蓋上蓋子，然後旋轉盤子，將液體均勻分佈在表面上。
  5. 蓋上蓋子後，使用封口膜密封瓊脂板。
  6. 在每個盤子上貼上蘑菇的菌株或種類、日期和任何其他相關資訊。
  7. 在適合特定蘑菇菌株或物種的適當溫度和條件下培養平板。

    培養瓊脂平板

    對於大多數物種，瓊脂平板可以在室溫下培養。在瓊脂平板上看到菌絲體生長所需的時間可能會有所不同，具體取決於多種因素，包括正在生長的真菌類型、培養環境的溫度和濕度以及瓊脂平板的壽命和狀況。一般來說，大多數類型的真菌將在孵化後 3 至 7 天內開始出現明顯的生長，但某些物種可能需要更長時間。定期監測平板並尋找任何污染跡象非常重要，例如黴菌或細菌生長，這可能會幹擾菌絲體的生長。

    瓊脂到瓊脂轉移

    當菌絲體定植到瓊脂平板的大約 80-90% 時，您可以選擇將培養物轉移到其他瓊脂平板上。如果您在平板上遇到污染的部分，您可以轉移未受影響的部分以獲得乾淨的培養物。根據污染程度，可能需要多次轉移才能實現完全清潔的培養物。若要將菌絲體從一個瓊脂板轉移到另一個瓊脂板，請在流動罩或靜氣箱 (SAB) 內執行以下步驟：

    1. 對工具進行消毒：對用於瓊脂間轉移的所有工具進行消毒。將手術刀或鑷子消毒至紅熱，然後冷卻後再切入瓊脂。
    2. 選擇健康的菌絲體菌落：從供體瓊脂平板中選擇健康、發育良好的菌絲體菌落。該菌落應該活躍生長並且沒有任何可見的污染物。
    3. 切一小片菌絲體：使用無菌手術刀或鑷子，從供體菌落邊緣切下一小片菌絲體。小心不要接觸瓊脂表面的任何其他部分。
    4. 將菌絲體轉移到新平板上：提起接收瓊脂平板的蓋子，並用手術刀或環在瓊脂上做一個小切口。輕輕地將菌絲體碎片放在新平板上，確保其黏附在瓊脂表面。蓋上板的蓋子，然後用封口膜密封板。
    5. 標記新板：在新板上標記菌株名稱、日期和任何其他相關資訊。這將幫助您追蹤文化及其發展。
    6. 培養新平板：在適合特定蘑菇種類的溫度和濕度條件下培養新平板。定期檢查板是否有生長和污染的跡象。